Guido von Lusignan war ein Adliger aus dem 13. Jahrhundert. Er stammte aus der Familie der Lusignans, einer mächtigen Adelsdynastie in Frankreich und später auch Zypern.
Guido von Lusignan wurde um das Jahr 1228 geboren und war der dritte Sohn von Hugo X. von Lusignan, dem Grafen von La Marche. Seine Brüder waren Johann I. von Lusignan, König von Jerusalem und spätere König von Zypern, und Hugo XI., Graf von La Marche und Angoulême.
Guido von Lusignan kämpfte während des Kreuzzugs von Damiette (1249-1250) in Ägypten und spielte eine wichtige Rolle in den Kämpfen gegen die muslimische Ayyubiden-Dynastie. Nachdem sein älterer Bruder Johann I. König von Zypern wurde, setzte er Guido von Lusignan als Statthalter auf der Insel ein.
Guido von Lusignan heiratete Philippa von Antiochia, eine Prinzessin aus dem Königreich Kleinarmenien. Gemeinsam hatten sie zwei Söhne: Johann, den späteren König von Zypern, und Hugo, der früh verstarb.
Im Jahr 1267 wurde Guido von Lusignan zum Ritter des Hosenbandordens ernannt, einer der höchsten Auszeichnungen in England. Er blieb bis zu seinem Tod im Jahr 1288 ein wichtiger Berater und Unterstützer seines Bruders Johann I. von Zypern.
Guido von Lusignan wurde in der königlichen Grablege in der Kathedrale von Famagusta auf Zypern beigesetzt. Seine Nachkommen spielten eine bedeutende Rolle in der Geschichte von Zypern und in den weiteren Kreuzzügen.
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